知識分享

2023.05.31

濕式培養系統有助於提高不孕患者之臨床懷孕率

隨著時間的推移,生殖實驗室中使用的培養箱經歷了深刻的演變,新一代培養箱具有獨立的小體積培養腔室,可最大限度地減少開門後培養條件的波動及其對胚胎發育的不利影響。最新型培養箱中最常見的加熱系統是用加熱表面與培養皿直接接觸,這與舊型培養箱中是用加熱潮濕氣流的再循環相反。這些變化共同允許培養腔室在內部乾燥的環境使用,避免在溼式培養箱中很常見潛在的真菌污染的情形。

    然而,因為乾式培養 ( Dry culture , DC) 不同於生理條件,一些專家認為乾式培養可能對胚胎發育產生負面影響。幾項研究表明,與濕式環境相比,乾式條件有利於培養液的蒸發,導致滲透壓逐漸增加,這在各種動物模型中被證明對胚胎有害。已知培養液中的高滲透壓(超過300 mOsm/kg)與發育停滯、基因表達變化和表觀遺傳改變有關。

    Fawzy 2017年發表的結果表明,與在乾式條件下培養的胚胎相比,在濕式培養(Humid culture, HC)中發育的胚胎在第3天具有更高的細胞聚合效率(compaction rate)、更高的囊胚率、較佳的形態質量以及更高的懷孕率、持續懷孕率和著床率。

    以前評估濕度對胚胎培養的影響的研究使用了傳統培養箱,這些培養箱最初設計用於在乾燥條件下工作,通過在其中放置一個裝滿水的培養皿來加濕多個腔室;並且使用連續培養液,在第3天更新培養基,減輕蒸發的總體影響。

    最近,濕式培養被重新引入胚胎培養箱,包括「胚胎縮時攝影培養箱 (Time-lapse)」,例如 Geri® 培養箱(Genea Biomedx,澳大利亞)。該培養箱有六個獨立的腔室,適用於個體患者,具有獨立控制的條件,任何腔室的內部都可以通過特定的水瓶適配器進行加濕,胚胎可以在同一培養箱中選擇在乾式或濕式的環境中培養,保持其餘培養條件相同。使用上述配置,本回顧性研究的目的是確定在使用單一培養液和縮時攝影胚胎培養箱時,高相對濕度是否會改善胚胎發育和臨床結果。

    該研究包括1627個「單一精蟲顯微注射術(ICSI)」療程,其中794個療程胚胎培養在乾式,833個療程培養在濕式的培養箱中,療程類型包括卵子捐贈療程、不進行基因檢測的自體療程和有進行「胚胎著床前染色體篩檢(PGT-A或稱PGS)」的自體療程。在胚胎發育方面,結果顯示兩組間第5天和第6天囊胚率、優質囊胚、特優囊胚和可用囊胚的比例沒有顯著差異;在PGT-A療程中,兩組的胚胎切片率和整倍體率無顯著差異;兩組間移植胚胎的平均形態學分數無統計學差異。

觀察胚胎形態動力學參數,結果表明胚胎在溼式培養中早期發育速度更快。早期胚胎發育相關變量在乾式培養中顯著延遲且第一個細胞週期的持續時間在乾式培養中明顯延長。然而,明顯延遲的桑葚胚胎期時間是唯一具有統計差異的發育後期變量,其他與囊胚形成的相關事件中,兩組間均未發現統計學上的顯著差異。

本院依需求提供患者據各式不同的培養系統
▲本院依需求提供患者據各式不同的培養系統
本院於乾式培養箱中進行加濕處理
本院於乾式培養箱中進行加濕處理

實驗發現:採用濕式培養箱的胚胎,懷孕率較高

單變量邏輯回歸量化濕式培養對於懷孕率、持續懷孕、活產和流產結果的影響,利用治療權重倒數機率 (IPTW) 進行加權,該模型確定在濕式培養的胚胎比在乾式培養的胚胎更有可能實現臨床懷孕按療程類型進行的分層分析表明,濕式培養對懷孕結果的影響在PGT-A療程中非常顯著,但在自體療程和卵子捐贈療程中無統計學意義。本篇的結果表明,使用縮時攝影胚胎培養箱和單一培養液培養之胚胎,在相對濕度較高的環境中培養,可以增加胚胎實現臨床懷孕的可能性,此關聯性於PGT-A療程中更具明顯。此外,胚胎於濕式培養下具顯著較快的早期發育結果,此特徵可能與後續較佳的懷孕結果有關。

作者 / 資深胚胎師 林佩彣  資深胚胎師 陳建宏 博士 
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